Основных персонажей в Resident Evil 3 не так и много, так что перечислить их большой проблемой не станет.
Джилл Валентайн - главная героиня, которая, несмотря на свою довольно хрупкую внешность, блестяще умеет обращаться с оружием и взрывчаткой, первоклассный специалист в своем деле, старший офицер специальных операций США в Альянсе по оценке безопасности биотерроризма.
Карлос Оливейра - второй главный герой, оказавшийся на месте действия в составе роты из 120 человек. Умелый наемник, безупречно владеющий тяжелым оружием и техникой, к моменту событий игры является спецназовцем Амбреллы, однако не отличается слепой приверженностью работодателю, осознавая, что тот натворил.
Немезис - мутант, биологическое оружие, следующая ветвь эволюции проекта Тиран. Практически неуязвимое существо, которое еще и быстрое, сильное, стремительно обучающееся и способное даже использовать оружие. Обладает высочайшей регенерацией, в связи с чем практически не уязвим ни для какого обычного оружия, а для полной надежности оснащен пуленепробиваемым плащом.
Михаил Виктор - еще один боец Umbrella из отдела службы противодействия биологической опасности, как и Карлос. Сопровождает последнего и Николая для устранения эпидемии. Плохо был осведомлен о реальном положении вещей, потому был не лучшим образом подготовлен к тому, с чем довелось столкнуться.
Николай Зиновьев - член отряда UBCS, один из главных антагонистов. Был прислан в Раккун-Сити для исследования эффективности проекта Немезис. Умен, циничен, хладнокровен, расчетлив и жесток.
Тайрелл Патрик - соратник Карлоса, отличается высокими хакерскими способностями, за счет которых нередко помогает обоим главным героям в их поисках выживших и не только. Также изначально трудится на компанию Umbrella.
Мерфи Сикер - умелый снайпер и коллега Карлоса, но ему не повезло получить ранение в боях с зараженными.
Брэд Викерс - старый знакомый Джилл, умелый пилот вертолета, член службы безопасности звездного тыла, ранее помогал главной героине заниматься расследованием незаконной деятельность Umbrella.
Дарио Россо - выживший в эпидемии, один из немногих, кто избежал быстрого заражения и гибели от зараженных.